Amfolit digunakan untuk membentuk gradien pH di dalam kapiler, dan protein yang akan dipisahkan bermigrasi (atau difokuskan) melalui media amfolit sampai menjadi tidak bermuatan pada pI nilai.
Mengapa amfolit digunakan di IEF?
Dalam IEF, amfolit bepergian menurut muatannya di bawah pengaruh medan listrik, dengan adanya gradien pH, sampai muatan bersih molekul adalah nol (misalnya, titik isoelektrik, pI). … Bahkan amfolit yang paling sederhana (misalnya, asam amino) dapat membuat gradien pH dan bertindak sebagai buffer isoelektrik.
Mengapa titik isoelektrik penting?
Titik isoelektrik penting dalam pemurnian protein karena mewakili pH di mana kelarutan biasanya minimal. … Polimer ini memiliki sifat unik untuk memastikan bahwa protein membentuk gradien pH saat Anda menerapkan medan listrik di seluruh larutan.
Bagaimana amfolit membuat gradien pH?
Dalam CIEF, gradien pH heterogen dibuat di dalam kapiler dengan menerapkan tegangan melintasi amfolit pembawa Luasnya gradien pH tergantung pada rangkaian amfolit yang dipilih. Amfolit tersedia secara komersial untuk mencakup rentang pH yang lebar dan sempit, seperti yang ditunjukkan pada Gambar 5.2.
Apa itu kimia amfolit?
Amfolit adalah senyawa yang bila dilarutkan dalam air (yang merupakan senyawa amfoter) dapat bertindak baik sebagai asam maupun sebagai basa.