Untuk mengurangi pengikatan antibodi non-spesifik dan, sebagai akibatnya, mengurangi sinyal latar belakang, disarankan untuk menggunakan larutan penghambat sebelum inkubasi dengan antibodi Solusi penghambat yang paling efektif akan yang mengandung serum dari spesies yang sama di mana antibodi sekunder dinaikkan.
Bagaimana Anda mencegah noda latar belakang?
Mengurangi ketebalan bagian jaringan dapat membantu mengurangi pewarnaan latar belakang. Coba potong bagian yang lebih tipis untuk IHC yang lebih bersih. Penting juga untuk berhati-hati agar bagian tidak mengering karena pengeringan dapat menghasilkan pewarnaan non-spesifik yang tinggi.
Bagaimana Anda mengoptimalkan imunofluoresensi?
Immunofluorescence Microscopy: 10 Tips Teknis untuk Sukses
- Fisasi sel dan Permeabilisasi. …
- Spesifikasi Antibodi. …
- Menggunakan pengenceran antibodi yang sesuai. …
- Mengoptimalkan Buffer dan Agen Pemblokiran. …
- Menggunakan Kepadatan Sel yang Sesuai. …
- Pewarnaan Ganda. …
- Antibodi Sekunder. …
- Mengurangi Latar Belakang.
Apa yang menyebabkan pewarnaan latar belakang?
Pewarnaan latar belakang dapat disebabkan oleh pengikatan antibodi yang tidak tepat atau kesalahan selama pembuatan slide jaringan.
Apakah antibodi sekunder mengurangi sinyal latar belakang?
F(ab) antibodi sekunder spesifik dapat membantu mengurangi sinyal latar dengan menghilangkan ikatan nonspesifik protein IgG yang ditemukan di jaringan oleh antibodi sekunder.
