Bagaimana cara terbaik untuk memisahkan kloroplas dari buffer?

2024 Pengarang: Fiona Howard | [email protected]. Terakhir diubah: 2024-01-10 06:39

Untuk dapat mengekstrak pigmen dari kloroplas disuspensikan dalam buffer isolasi. Untuk dapat mengekstrak pigmen dari kloroplas, kita harus menyingkirkan buffernya terlebih dahulu. Apa cara terbaik untuk memisahkan kloroplas dari buffer? gunakan centrifuge untuk memisahkan

Bagaimana cara mengisolasi kloroplas?

Dalam metode isolasi kloroplas, dinding sel dipecah secara mekanis menggunakan blender atau homogenizer. Kemudian jaringan daun yang tidak terputus dan puing-puing seluler dihilangkan dengan penyaringan. Kloroplas dikumpulkan dengan sentrifugasi menggunakan gradien percoll.

Bagaimana cara membuat penyangga isolasi kloroplas?

Siapkan buffer Isolasi 1X Kloroplas sebanyak yang dibutuhkan dengan encerkan 2X buffer stock 1:1 dengan air dH2O Tambahkan 10 L larutan BSA 10% per mL 1X Kloroplas penyangga isolasi. Sesaat sebelum digunakan, tambahkan 1 L DTT per 1 mL Chloroplast Isolation Buffer. Beri label buffer ini sebagai 'Complete Buffer'.

Apa yang ada di dalam buffer isolasi kloroplas?

DNA buffer isolasi terdiri dari 100 mM NaCl, 100 mM Tris-HCl (pH 8.0), 50 mM EDTA, dan 1 mM DTT Lise kloroplas diperoleh dengan menginkubasi pelet kloroplas dengan 8 ml buffer isolasi DNA, 1,5 ml 20% SDS, 20 l 2-Mercaptoethanol dan 30 l Proteinase K (10 mg/ml) ke dalam tabung sentrifus pada suhu 55°C selama 4 jam.

Berapa pH buffer yang digunakan untuk menghomogenkan daun bayam dalam protokol isolasi kloroplas?

Bayam mengandung kloroplas yang baik dan mudah diisolasi. Anda harus memasukkan daun ke dalam blender dingin dengan buffer fosfat 0,1 M, pH 7,5 dan sukrosa 0,5 M agar tidak pecah.