Vortexing tidak akan memotong RNA Anda untuk membuatnya tidak dapat digunakan jika Anda melakukan RT priming acak - hanya jika Anda ingin mengkloning mRNA panjang. Dukungan teknis Invitrogen juga benar. Kloroform lebih berat dari Trizol dan akan tenggelam ke dasar tabung.
Apakah aman untuk vortex RNA?
Jangan vortex Trizol lisat atau sampel RNA untuk menghindari geser. Setelah ekstraksi, simpan sampel RNA di atas es setiap saat. Protokol ini dirancang untuk sampel yang dilisiskan 1mL Trizol dalam tabung 1,5 atau 2mL.
Bisakah Anda memanaskan RNA?
Oleh karena itu, hindari suhu tinggi ( di atas +65°C) karena ini mempengaruhi integritas RNA. Sebagai gantinya, untuk mencairkan struktur sekunder, panaskan RNA hingga +65°C selama 15 menit dengan adanya buffer denaturasi.
Bagaimana cara meresuspensi pelet RNA?
suspensikan kembali pelet Anda dengan air hangat (40-50 derajat celc). inkubasi pada suhu 45 derajat celc selama 10 menit. letakkan di +4 selama 4-6 jam.
Bagaimana cara mengendapkan RNA?
A.
Setelah konsentrasi garam diatur, RNA dapat diendapkan dengan menambahkan 2,5 volume etanol atau 1 volume isopropanol dan mencampurnya secara menyeluruh, diikuti dengan pendinginan selama minimal 15 menit pada -20° C.
