Pedoman untuk mencairkan sel
- Cairkan sel beku dengan cepat (< 1 menit) dalam penangas air 37°C.
- Encerkan sel yang telah dicairkan secara perlahan sebelum Anda menginkubasinya, menggunakan media pertumbuhan yang telah dihangatkan sebelumnya.
- Plate mencairkan sel dengan kepadatan tinggi untuk mengoptimalkan pemulihan.
- Selalu gunakan teknik aseptik yang tepat dan bekerja di kap aliran laminar.
Mengapa pencairan sel dilakukan?
Sangat penting untuk mencairkan sel dengan benar untuk menjaga kelangsungan hidup kultur dan memungkinkan biakan pulih lebih cepat. Beberapa krioprotektan, seperti DMSO, bersifat toksik di atas 4 °C. Oleh karena itu, sangat penting bahwa kultur dicairkan dengan cepat dan diencerkan dalam media kultur untuk meminimalkan efek toksik.
Bagaimana proses pencairannya?
Thawing adalah proses mengambil produk beku dari beku ke suhu (biasanya di atas 0°C) di mana tidak ada sisa es, yaitu "pencairan". Pencairan sering dianggap sebagai kebalikan dari proses pembekuan.
Apa cara terbaik untuk membekukan sel?
Bekukan sel secara perlahan dengan menurunkan suhu sekitar 1°C per menit menggunakan pembekuan krio dengan kecepatan terkontrol atau wadah pembekuan krio seperti “Mr. Frosty,” tersedia dari labware Thermo Scientific Nalgene (Nalge Nunc). Selalu gunakan media pembekuan yang disarankan.
Bagaimana cara mencairkan sel primer?
Seka bagian luar vial sel dengan etanol 70% atau isopropanol. Dalam kabinet biosafety, putar tutupnya seperempat putaran untuk menghilangkan tekanan internal dan kemudian kencangkan kembali. Lelehkan sel dengan cepat dalam penangas air 37°C dengan memutar botol secara perlahan. Keluarkan vial saat es tersisa sedikit.
